Persistent cutaneous canine leishmaniasis caused by Leishmania (Viannia) braziliensis in an area with predominance of Nyssomyia neivai in the state of São Paulo, Brazil / Leishmaniose cutânea canina persistente causada por Leishmania (Viannia) braziliensis em uma área com predomínio de Nyssomyia neivai no estado de São Paulo, Brasil

Abstract American cutaneous leishmaniasis (ACL) is a neglected zoonotic disease caused mainly by Leishmania (Viannia) braziliensis, which is endemic throughout Brazil. Canine ACL cases were investigated in a rural area of Monte Mor, São Paulo, where a human ACL case had been confirmed. Dogs were evaluated through clinical and laboratory diagnosis including serology, cytological tissue preparations and PCR on skin lesions, lymph node and bone marrow samples. Entomological investigations on sandflies trapped in the surroundings of the study area were performed for 14 months. Nyssomyia neivai was the predominant phlebotomine species, comprising 94.65% of the captured specimens (832 out of 879). This species was the most abundant in all trapping sites, including human homes and dog shelters. Ny. whitmani, Migonemyia migonei, Pintomyia monticola, Evandromyia cortellezzii, Pi. fischeri and Expapilata firmatoi were also captured. Two of the three dogs examined were positive for anti-Leishmania IgG in ELISA using the antigen Fucose mannose ligand and skin samples were positive for L. (V.) braziliensis in PCR, but all the samples collected were negative for L. (L.) infantum. One of the dogs had a confirmed persistent infection for more than one year.

Resumo A leishmaniose tegumentar Americana (LTA) é uma doença zoonótica negligenciada, causada principalmente por Leishmania (Viannia) braziliensis, sendo endêmica em todo o Brasil. Foram investigados casos de LTA canina em uma área rural da cidade de Monte Mor, São Paulo, onde foi confirmado um caso humano de LTA. Os cães foram avaliados por diagnóstico clínico e laboratorial, incluindo sorologia, esfregaços microscópicos e PCR de amostras em lesões de pele, linfonodos e medula óssea. Também foram realizadas investigações entomológicas durante 14 meses, usando-se armadilhas luminosas para flebotomíneos nas proximidades da área de estudo. Nyssomyia neivai foi a espécie de flebotomíneo predominante com 94,65% dos espécimes capturados (832 de 879). Essa espécie foi a mais abundante em todos os locais de captura, incluindo-se abrigos para humanos e cães. Foram também capturadas as espécies Ny. whitmani, Migonemyia migonei, Pintomyia monticola, Evandromyia cortellezzii, Pi. fischeri e Expapilata firmatoi. Dos três cães examinados, dois apresentaram IgG anti-Leishmania positivo no ELISA, usando-se o antígeno "Fucose mannose ligand", PCR da lesão de pele positivo para L. (V.) braziliensis e negativo em todas amostras para L. (L.) infantum. Um dos cães apresentou infecção persistente por mais de um ano.

Cutaneous leishmaniasis in Cavia porcellus (guinea pig): case report / Leishmaniose cutânea em Cavia porcellus (cobaia): relato de caso

Leishmaniasis is a parasitic disease of worldwide spread. It is caused by protozoa of the genus Leishmania and is transmitted to animals and humans through the bite of sand flies. In Brazil, leishmaniasis is one of the zoonoses of major importance and expansion. The objective of this work is to describe the clinical, pathological, immunohistochemical and molecular findings of cutaneous leishmaniasis by Leishmania enriettii in guinea pig (Cavia porcellus). Three animals had nodular and alopecia lesions on the muzzle, ears and ulcerated lesions on the distal extremities of the pelvic limbs. The males (2) also had diffuse thickening of the scrotal skin. Samples of the ulcerated cutaneous lesions were evaluated by cytology which were observed as amastigote forms of Leishmania. One of the animals was euthanized and necropsied. Histopathology showed abundant dermal infiltrate of macrophages, plasma cells, lymphocytes and multinucleated giant cells. Numerous macrophages contained parasitoid vacuoles with amastigote forms, evidenced by immunohistochemical examination. The molecular characterization based on the SSUrDNA gene identified the species as L. enrietti. The diagnosis of cutaneous leishmaniasis in these cases was based on pathological findings and confirmed by immunohistochemistry, PCR and sequencing.(AU)

A leishmaniose é uma doença parasitária de distribuição mundial. É causada por protozoários do gênero Leishmania e é transmitida para animais e seres humanos por meio da picada de flebotomíneos. No Brasil, a leishmaniose é uma das zoonoses de maior importância e expansão. O objetivo deste trabalho é descrever os achados clínicos, patológicos, imuno-histoquímicos e moleculares de leishmaniose cutânea por Leishmania enriettii em cobaia (Cavia porcellus). Três animais apresentavam lesões nodulares e alopécicas no focinho e orelhas, além de lesões ulceradas nas extremidades distais dos membros pélvicos. Nos machos (2), foi observado espessamento difuso da pele escrotal. Amostras das lesões cutâneas ulceradas foram avaliadas por citologia, nas quais foram observadas formas amastigotas de Leishmania. Um dos animais foi submetido à eutanásia e necropsiado. Na histopatologia, foi observado infiltrado dérmico abundante de macrófagos, plasmócitos, linfócitos e com células gigantes multinucleadas. Numerosos macrófagos continham vacúolos parasitóforos com formas amastigotas, evidenciados por meio do exame de imuno-histoquímica. A caracterização molecular baseada no gene de SSUrDNA identificou a espécie como L. enrietti. O diagnóstico de leishmaniose cutânea nesses casos foi baseado nos achados patológicos e confirmado pelas técnicas de imuno-histoquímica, PCR e sequenciamento.(AU)

Epidemiological aspects of Leishmaniasis in the Pantanal region of Mato Grosso / Aspectos epidemiológicos das Leishmanioses na região do Pantanal de Mato Grosso

Abstract Leishmaniasis is a disease caused by the protozoan Leishmania parasite that is disseminated by some species of sandflies and hosted by a variety of reservoirs. The objective of the present study was to evaluate the epidemiological situation of leishmaniasis in the municipalities of the Mato Grosso Pantanal. Human data were obtained from the Information System of Notifiable Diseases, and the canine and vector results from the State Department of Health of Mato Grosso. Between 2007 and 2016, 10 cases of visceral leishmaniasis and 499 cases of tegumentary leishmaniasis were identified in the Pantanal region. The surveillance studies regarding the canine reservoir demonstrated that the parasite was present in six of the seven municipalities. Vectors of visceral leishmaniasis were present in five municipalities and vectors of tegumentary leishmaniasis in six. Enhancement of services aimed at controlling this disease is fundamental to prevent an increase in the number of cases in the region.

Resumo As leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania disseminadas por algumas espécies de flebotomíneos e participação de uma variedade de reservatórios. O objetivo do presente estudo foi avaliar a situação epidemiológica das leishmanioses nos municípios abrangentes do Pantanal de Mato Grosso. Os dados humanos foram obtidos do Sistema de Informações de Agravos de Notificação e os resultados caninos e vetoriais junto à Secretaria de Estado de Saúde de Mato Grosso. A região do Pantanal registrou no período de 2007 a 2016, dez casos da forma visceral e 499 casos da forma tegumentar. As ações de vigilância para o reservatório canino demonstraram a circulação do parasito em seis dos sete municípios. A presença dos vetores de leishmaniose visceral ocorreu em cinco municípios e os da leishmaniose tegumentar em seis. O fortalecimento dos serviços voltados para controle desse agravo é fundamental para evitar o aumento no número de casos da região.

Molecular detection of Leishmania infantum DNA according to clinical stages of leishmaniasis in dog / Deteção molecular de DNA de Leishmania infantum em diferentes estágios clínicos da leishmaniose em cães

Abstract The aim of this study was to compare molecular tests used to diagnose Leishmania spp. in dogs with different stages of infection. Blood and conjunctival swab (CS) samples from dogs classified in four clinical stages were subjected to different PCR protocols (13A/13B, MC1/MC2, LITSR/L5.8S and LEISH-1/LEISH-2 primers). To the study, 22.3% (48/215) of dogs were classified as without clinical signs, 67.5% (145/215) stage I (mild disease), 7.0% (15/215) stage II (moderate disease) and 3.2% (7/215) stage III (severe disease). The results showed that in blood samples, 13A/13B detected a significant higher number of positive dogs in stage I (25/145) and in total (42/215) (p≤0.05). However, when CS samples were tested, no difference was observed (p>0.05). On the other hand, in blood samples, MC1/MC2 detected significantly fewer positive dogs classified as without clinical signs (0/48), in stage I (0/145) and in total (1/215) (p≤0.05). Likewise, in CS samples, this primers showed also lower detection (1/215) (p≤0.05). So than, we can conclude that PCR on blood samples with 13A/13B primers has greater capacity to detect positive dogs, mainly at the initial of clinical disease than do other primers and MC1/MC2 are not a good choice to detect Leishmania infantum infection in dogs.

Resumo O objetivo deste estudo foi comparar testes moleculares usados para diagnosticar Leishmania spp., em cães apresentando diferentes estágios de infecção. Amostras de sangue e suabe conjuntival (SC) de cães classificados em quatro estágios clínicos foram submetidas a diferentes PCRs (primers 13A/13B, MC1/MC2, LITSR/L5.8S e LEISH-1/LEISH-2). Para o estudo, 22,3% (48/215) dos cães foram classificados como sem sinais clínicos, 67,5% (145/215) estágio I (doença leve), 7,0% (15/215) estágio II (doença moderada) e 3,2% (7/215) estágio III (doença grave). Os resultados mostraram que, em amostras de sangue, 13A/13B detectou número significativamente maior de cães positivos no estágio I (25/145) e no total (42/215) (p≤0,05). No entanto, quando as amostras de SC foram testadas, nenhuma diferença foi observada (p>0,05). Por outro lado, no sangue, MC1/MC2 detectou significativamente menos cães positivos sem sinais clínicos (0/48), em estágio I (0/145) e no total (1/215) (p≤0,05). Da mesma forma, em amostras de SC, MC1/MC2 também apresentou menor detecção (1/215) (p≤0,05). Assim, a PCR em amostras de sangue com 13A/13B tem maior capacidade de detectar cães positivos, principalmente no início da doença do que outros primers, e o par de primers MC1/MC2 não é uma boa escolha para detectar infecção por Leishmania infantum em cães.

Serodiagnosis of visceral and cutaneous leishmaniasis in human and canine populations living in Indigenous Reserves in the Brazilian Amazon Region

ABSTRACT INTRODUCTION: Leishmaniasis is endemic to the Northern, Northeastern, Central-Western, and Southeastern regions of Brazil. We aimed to assess the epidemiological situation of leishmaniasis in humans and dogs in indigenous villages located in the States of Mato Grosso and Tocantins using a serological survey conducted in May 2011. METHODS: Serum samples were collected from 470 humans and 327 dogs living in villages of the Urubu Branco and Tapirapé Karajá indigenous reserves. The samples were analyzed for the presence of Leishmania spp. antibodies using the indirect fluorescent antibody test (IFAT), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with a crude antigen (CA) and soluble antigen (SA), and Dual Path Platform (DPP®) immunoassay for canine visceral leishmaniasis. RESULTS: Of 470 human samples tested, two (0.4%) were positive using IFAT. Among 327 dog samples tested, 28 (8.6%) were positive using ELISA CA, five (1.5%) using ELISA SA, two (0.6%) using IFAT, and none using DPP® immunoassay with Leishmania infantum chagasi antigen. When Leishmania amazonensis antigen was used, 20 (6.1%) samples were positive using ELISA CA and four (1.2%) using IFAT. CONCLUSIONS: There was a low prevalence of infection in the region, and significant differences among the main serological methods used for the diagnosis of leishmaniasis. These findings indicated that the detection of Leishmania spp. requires further study and improvement.

Canine cutaneous leishmaniasis by Leishmania (Viannia) braziliensis in an agricultural settlement, endemic area for leishmaniasis / Leishmaniose tegumentar canina por Leishmania (Viannia) braziliensis em um assentamento agrícola, área endêmica para leishmanioses

Cutaneous leishmaniasis has several species of Leishmania as agents, and a wide variety of wild and domestic animals as hosts and different species of phlebotomines as vectors. A case of cutaneous leishmaniasis in a dog coming from an agricultural settlement is described. This is the first report of parasitism in a dog by Le. (Viannia) braziliensis in Mato Grosso do Sul State. Attention is called to the importance of including this protozoonosis in the differential diagnosis of dermopathies in dogs as also the need to assess the importance of the domestic dog as a possible reservoir of Le. braziliensis.(AU)

As leishmanioses tegumentares são antropozoonoses metaxênicas de importância em saúde pública. Possuem como agentes etiológicos várias espécies de Leishmania, com ampla variedade de hospedeiros, como animais selvagens e domésticos, e diferentes espécies de flebotomíneos como vetores. Um caso de leishmaniose tegumentar em um cão procedente de um assentamento agrícola em Mato Grosso do Sul é descrito, sendo este o primeiro relato de parasitismo em cão doméstico nesse estado por Le. (Viannia) braziliensis. Alerta-se para a importância de se incluir essa protozoonose no diagnóstico diferencial de dermopatias em cães e para a necessidade de se avaliar o papel do cão doméstico como reservatório de Le. (Vi.) braziliensis.(AU)

Parasite load in intact and ulcerative skin of dogs with leishmaniais / Carga parasitária em fragmentos de pele intacta e ulcerada em cães com leishmaniose

Abstract The skin is the site of inoculation of Leishmania spp. in susceptible hosts, and consequently dermatopathies, especially ulcerative dermatitis, are the main clinical signs observed. The aim of this study was to assess parasitism of the skin (intact and ulcerated) among dogs that were naturally infected by Leishmania spp., through immunohistochemical analysis. Skin fragments (intact and ulcerated) were collected from 13 dogs with positive parasitological (bone marrow aspiration and exfoliative skin) and serological examinations (ELISA S7® Biogene) forLeishmania spp. These samples were processed using the immunohistochemical technique, involving the streptavidin-peroxidase complex. Ulcerative lesions were mainly observed on the elbows (53.84%; 7/13), nostrils (15.38%; 2/13), ears (23.07%; 3/13) and wings of the ilium (7.69%; 1/13). A severe parasite load was detected in 46.15% and 76.92% of the intact and ulcerated skin samples tested, respectively. The parasite load on ulcerated skin was statistically higher than on intact skin (p = 0.0221). These results indicate that the intact and ulcerated skin may host a high parasite load of amastigote forms of Leishmania spp., which can favor the transmission of the parasite.

Resumo A pele é o local de inoculação da Leishmania spp. nos hospedeiros susceptíveis e dessa forma, as dermatopatias, principalmente as dermatites ulcerativas são os principais sinais clínicos observados. O objetivo deste estudo foi avaliar o parasitismo na pele (íntegra e ulcerada) em cães naturalmente infectados por Leishmania spp. através da técnica de imunohistoquímica. Fragmentos de pele (íntegra e ulcerada) foram coletados de 13 cães com diagnóstico parasitológico (aspirado de medula óssea e esfoliação cutânea) e sorológico positivos (ELISA S7® Biogene) paraLeishmania spp. Amostras foram processadas por imunohistoquímica pelo complexo estreptoavidina-peroxidase. As lesões ulcerativas foram observadas principalmente nas regiões do cotovelo 53,84% (7/13), narina 15,38% (2/13), orelha 23,07% (3/13) e sobre a asa do ílio 7,69% (1/13). Uma intensa carga parasitária foi detectada 46,15% e 76,92% das amostras de pele íntegra e ulcerada, respectivamente. A carga parasitária na pele ulcerada foi estatisticamente superior à pele íntegra (p = 0,0221). Esses resultados indicam que a pele intacta e ulcerada pode albergar uma intensa carga parasitária de formas amastigotas de Leishmania spp., o que pode favorecer a transmissão do parasita.

Diagnostic methods to cutaneous leishmaniasis detection in domestic dogs and cats

Abstract: Cutaneous leishmaniasis is caused by different species of Leishmania. In domestic animals such as dogs and cats, the diagnostic consists of clinical, epidemiological and serological tests, which changes among countries all around the world. Because of this diversity in the methods selected, we propose this systematic literature review to identify the methods of laboratory diagnosis used to detect cutaneous leishmaniasis in domestic dogs and cats in the Americas. Articles published in the last 5 years were searched in PubMed, ISI Web of Science, LILACS and Scielo, and we selected 10 papers about cutaneous leishmaniasis in dogs and cats in the Americas. In Brazil, often the indirect immunofluorescence and enzyme immunoassay (ELISA) have been applied. Other countries like United States and Mexico have been using antigenic fractions for antibodies detections by Western blot. ELISA and Western blot showed a higher sensitivity and efficacy in the detection of leishmaniasis. Analysis of sensibility and specificity of the methods was rarely used. Although confirmatory to leishmaniasis, direct methods for parasites detection and polymerase chain reaction showed low positivity in disease detection. We suggested that more than one method should be used for the detection of feline and canine leishmaniasis. Serological methods such as Western blot and enzyme immunoassay have a high efficacy in the diagnosis of this disease.

NEW PRIMERS FOR DETECTION OF Leishmania infantum USING POLYMERASE CHAIN REACTION / Novos iniciadores para detecção de Leishmania infantum pela reação em cadeia da polimerase

SUMMARY Leishmania infantum causes visceral leishmaniasis (VL) in the New World. The diagnosis of VL is confirmed by parasitological and serological tests, which are not always sensitive or specific. Our aim was to design new primers to perform a Polymerase Chain Reaction (PCR) for detecting L. infantum. Sequences of the minicircle kinetoplast DNA (kDNA) were obtained from GenBank, and the FLC2/RLC2 primers were designed. Samples of DNA from L. infantum, Leishmania amazonensis, Leishmania braziliensis, Leishmania guyanensis, Leishmania naiffi, Leishmania lainsoni, Leishmania panamensis, Leishmania major and Trypanosoma cruzi were used to standardize the PCR. PCR with FLC2/RLC2 primers amplified a fragment of 230 bp and the detection limit was 0.2 fg of L. infantum DNA. Of the parasite species assayed, only L. infantum DNA was amplified. After sequencing, the fragment was aligned to GenBank sequences, and showed (99%) homology with L. infantum. In the analysis of blood samples and lesion biopsy from a dog clinically suspected to have VL, the PCR detected DNA from L. infantum. In biopsy lesions from humans and dogs with cutaneous leishmaniasis, the PCR was negative. The PCR with FLC2/RLC2 primers showed high sensitivity and specificity, and constitutes a promising technique for the diagnosis of VL.

RESUMO Leishmania infantum causa leishmaniose visceral (LV) no Novo Mundo. O diagnóstico de LV é confirmado por testes parasitológicos e sorológicos, os quais nem sempre são sensíveis ou específicos. Nosso objetivo foi desenhar novos iniciadores para realizar uma Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para detecção de L. infantum. Sequências do DNA do minicírculo do cinetoplasto (kDNA) foram obtidos do GenBank, e os iniciadores FLC2/RLC2 foram desenhados. Amostras de DNA de L. infantum, Leishmania amazonensis, Leishmania braziliensis, Leishmania guyanensis, Leishmania naiffi, Leishmania lainsoni, Leishmania panamensis, Leishmania major e Trypanosoma cruzi foram usados para padronizar a PCR. PCR com iniciadores FLC2/RLC2 amplificou um fragmento de 230 pb e detectou 0,2 fg de DNA de L. infantum.Das espécies de parasitos analisadas, somente DNA de L. infantum foi amplificado. Após sequenciamento, o fragmento foi analisado no GenBank, que mostrou homologia com L. infantum. Em análises de amostras de sangue e lesão de cão com suspeita clínica de LV, a PCR detectou DNA de L. infantum. Em amostras de lesão de humanos e cães com leishmaniose cutânea, a PCR foi negativa. A PCR padronizada com os iniciadores FLC2/RLC2 mostrou alta sensibilidade e especificidade, sendo técnica promissora para o diagnóstico de LV.

The spiny rat Proechimys guyannensis (Rodentia: Echimydae) fails to respond to intradermal inoculation with Leishmania (Viannia) braziliensis / O rato espinhoso Proechimys guyannensis (Rodentia: Echimydae) falhou para inoculação intradérmica com Leishmania (Viannia) braziliensis

Leishmaniasis a disease of worldwide occurrence is caused by protozoa of the Leishmania genus. In Brazil, Leishmania (Viannia) braziliensis is the main parasite responsible for the American cutaneous leishmaniasis. Main hosts of this protozoa are small wild mammals particularly marsupials and rodents. The aim of this study was to evaluate if spiny rat Proechimys guyannensis (Rodentia: Echimydae) has role in the cycle of the American cutaneous leishmaniasis caused by L. (V.) braziliensis. Thus, promastigotes (the flagellate stage) of Leishmania (Viannia) braziliensis were used to inoculate seven spiny rats (Proechimys guyannensis). After inoculated intradermal at the ear pinna, nose and plantar pad, the rats were monitored for 180 days. Tissue samples collected at 90 and 180 days from the rats proved to be negative for the presence of genetic material from the parasite. After euthanasia, the protozoa also failed to growth in culture medium containing tissue samples collected from the rats showing that there was no infection. These results fail to prove that spiny rat has a role in the cycle of the American cutaneous leishmaniasis caused by L. (V.) braziliensis.

A leishmaniose é uma doença de ocorrência mundial causada por protozoários do gênero Leishmania. No Brasil, a Leishmania (Viannia) braziliensis é o principal parasita responsável pela leishmaniose tegumentar americana. Os principais hospedeiros deste protozoário são pequenos mamíferos selvagens em particular marsupiais e roedores. O objetivo deste estudo foi avaliar o papel do rato espinhoso Proechimys guyannensis (Rodentia: Echimydae) no ciclo da leishmaniose tegumentar americana. Para isto, formas promastigotas (estágio flagelado) de Leishmania (Viannia) braziliensis foram inoculadas em sete ratos espinhosos (Proechimys guyannensis). Após a inoculação intradérmica no pavilhão auricular, focinho e área plantar, os ratos foram monitorizados durante 180 dias. Amostras de tecido colhidas aos 90 e 180 dias dos ratos revelaram-se negativas para a presença de material genético do parasita. Após eutanásia, tecidos coletados dos ratos também falharam para crescimento em meio de cultura demonstrando que não houve infecção. Estes resultados demonstram que o rato espinhoso não tem papel no ciclo da leishmaniose tegumentar americana causada por L. (V.) braziliensis.

The existence of only one haplotype of Leishmania major in the main and potential reservoir hosts of zoonotic cutaneous leishmaniasis using different molecular markers in a focal area in Iran

Introduction Leishmania major is the causative agent of zoonotic cutaneous leishmaniasis (ZCL), and great gerbils are the main reservoir hosts in Iran. Abarkouh in central Iran is an emerging focal point for which the reservoir hosts of ZCL are unclear. This research project was designed to detect any Leishmania parasites in different wild rodent species. Methods All rodents captured in 2011 and 2012 from Abarkouh district were identified based on morphological characteristics and by amplification of the rodent cytochrome b (Cyt b) gene. To detect Leishmania infection in rodents, deoxyribonucleic acid (DNA) of each ear was extracted. Internal transcribed spacer-ribosomal deoxyribonucleic acid (ITS-rDNA), microsatellites, kinetoplast deoxyribonucleic acid (kDNA) and cytochrome b genes of Leishmania parasites were amplified by polymerase chain reaction (PCR). Restriction fragment length polymorphism (RFLP) and sequencing were employed to confirm the Leishmania identification. Results Of 68 captured rodents in the region, 55 Rhombomys opimus were identified and nine Leishmania infections (9/55) were found. In addition, eight Meriones libycus and two Tatera indica were sampled, and one of each was confirmed to be infected. Two Meriones persicus and one Mus musculus were sampled with no infection. Conclusions The results showed that all 11 unambiguously positive Leishmania infections were Leishmania major. Only one haplotype of L. major (GenBank access No. EF413075) was found and at least three rodents R. opimus, M. libycus and T. indica—appear to be the main and potential reservoir hosts in this ZCL focus. The reservoir hosts are variable and versatile in small ZCL focal locations. .

Leishmaniose tegumentar americana canina na zona rural do município de São Miguel, Rio Grande do Norte / Leishmaniasis Tegumentary American dog in rural area of the county of São Miguel, Rio Grande do Norte

Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) constitui um problema de saúde pública emergente no Rio Grande do Norte, com relatos de casos humanos principalmente na Região Serrana do Alto Oeste do Estado. Uma vez que o cão tem um importante papel na manutenção da doença neste ambiente. O presente estudo teve por objetivo analisar prevalência da LTA canina em quatro localidades localizadas na Zona Rural do município de São Miguel, RN. Foram realizados exames clínicos e diagnóstico sorológico através das técnicas de ELISA e RIFI em 100 cães de diferentes sexo, idade e categorias companhia e de caça. Todas as localidades apresentaram cães soropositivos com resultados de 21% de positividade para a técnica de ELISA e 10% para a de RIFI. Maiores prevalências foram observadas em cães machos, assintomáticos, na faixa etária de dois anos de idade e de caça. O presente estudo confirma a importância epidemiológica como reservatório da infecção e poderá auxiliar nas medidas de prevenção e controle da doença no município.

American Cutaneous Leishmaniasis ( ACL) is an emerging public health problem in Rio Grande do Norte , with reports of humancases mainly in the mountainous region of the Upper Midwest state . Once the dog has an important role in maintaining the diseasein this environment the present study aimed to evaluate the prevalence of canine ACL at four sites located in the Rural Area of SãoMiguel , RN . Clinical and serological diagnosis through ELISA and IFA in 100 dogs of different sex, age and company categoriesand hunting were performed . All towns had seropositive dogs with results of 21 % positivity for ELISA and 10 % for the IFA.Highest prevalence rates were observed in males , healthy dogs aged two years old and hunting . The present study confirms theepidemiological importance as a reservoir of infection and may assist in the prevention and control of disease in the city.

Cutaneous leishmaniasis in northeastern Brazil: a critical appraisal of studies conducted in State of Pernambuco / Leishmaniose cutânea no nordeste do Brasil: uma avaliação crítica dos estudos realizados no Estado de Pernambuco

American cutaneous leishmaniasis (ACL) is a complex disease with clinical and epidemiological features that may vary from region to region. In fact, at least seven different Leishmania species, including Leishmania (Viannia) braziliensis, Leishmania (Viannia) guyanensis, Leishmania (Viannia) lainsoni, Leishmania (Viannia) naiffi, Leishmania (Viannia) shawi, Leishmania (Viannia) lindenbergi, and Leishmania (Leishmania) amazonensis, have been implicated in the etiology of ACL in Brazil, and numerous phlebotomine sandfly species of the genus Lutzomyia have been regarded as putative or proven vectors. Because ACL is a focal disease, understanding the disease dynamics at the local level is essential for the implementation of more effective control measures. The present paper is a narrative review about the ACL epidemiology in Pernambuco, northeastern Brazil. Furthermore, the need for more effective diagnosis, treatment, control and prevention strategies for the affected populations is highlighted. This paper will provide researchers with a critical appraisal of ACL in Pernambuco. Hopefully, it will also be helpful for public health authorities to improve current control strategies against ACL at the state and country levels.

A leishmaniose cutânea americana (LCA) é uma doença complexa com características clínicas e epidemiológicas que podem variar de região para região. De fato, pelo menos, sete diferentes espécies de Leishmania, incluindo Leishmania (Viannia) braziliensis, Leishmania (Viannia) guyanensis, Leishmania (Viannia) lainsoni, Leishmania (Viannia) naiffi, Leishmania (Viannia) shawi, Leishmania (Viannia) lindenbergi e Leishmania (Leishmania) amazonensis, têm sido incriminadas na etiologia da LCA no Brasil, e numerosas espécies de flebotomíneos do gênero Lutzomyia, foram considerados vetores suspeitos ou comprovados. Devido ao seu caráter focal, a compreensão da dinâmica da LCA a nível local é imprescindível para a implementação de medidas de controle eficazes. Este trabalho consiste de uma revisão narrativa sobre a epidemiologia da LCA em Pernambuco, nordeste do Brasil. Além disso, se enfatiza a necessidade de maior efetividade no diagnóstico, tratamento, controle e estratégias de prevenção para as populações afetadas. Este artigo fornecerá aos pesquisadores uma avaliação crítica da LCA em Pernambuco. Espera-se também contribuir com as autoridades de saúde pública no aprimoramento das estratégias atuais de controle da LCA nos níveis estaduais e nacional.

Soroprevalência da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) canina e fauna de Flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) em Bela Vista do Paraíso, Paraná / Seroprevalence of Cutaneous Leishmaniasis (LC) in dogs and identification of vectors (Diptera: Psychodidae) in Bela Vista do Paraíso, Parana state

O trabalho teve como objetivo determinar a soroprevalência da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) canina no município de Bela Vista do Paraíso, Paraná, comparar as técnicas de imunofluorescência indireta (IFI) e ensaio imunoenzimático (ELISA) e identificar as espécies de flebotomíneos presentes, possivelmente envolvidas no ciclo do parasito. Amostras de sangue de 489 cães foram submetidas à pesquisa de anticorpos anti-Leishmania sp. pela IFI e ELISA. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram título ≥ 40 na IFI e densidade ótica ≥ 0.174 no ELISA. Entre as amostras analisadas, 222 (45,4%) foram reagentes pela IFI e 189 (38,7%) pelo ELISA. Comparando-se os testes foram encontradas 176 amostras positivas (36,0%) e 254 negativas (51,9%) para ambas as técnicas. A sensibilidade do ELISA foi de 79,3% e a especificidade foi de 95,1%. O coeficiente global do teste foi de 87,0% com coeficiente Kappa de 0,75. A análise das variáveis para cães com sorologia positiva pela IFI demonstrou diferença significativa em relação à ausência de matas e ausência de convívio com outras espécies animais. Em cães sororeagentes pelo ELISA as variáveis que apresentaram diferença significativa foram o tipo de mata ciliar existente no ambiente, a ausência de lixo, o esgoto a céu aberto e lançado diretamente em rios ou córregos e do lixo lançado em terreno baldio, queimado ou enterrado. O resultado obtido com a captura dos flebotomíneos foi a predominância do Lutzomyia whitmani com 79,9% das espécies coletadas. Os resultados demonstraram que a LTA está amplamente disseminada na população canina do município de Bela Vista do Paraíso, e que tanto a IFI como o ELISA podem ser utilizados para o diagnóstico. Deste modo o cão apresenta-se como um elo entre o ciclo silvestre e o peridomiciliar da LTA, podendo tornar-se um sinalizador do agente no ecossistema da doença nesse ecossistema.

The aim of this study was to determine the seroprevalence of Cutaneous Leishmaniasis (CL) in dogs of Bela Vista do Paraiso, Parana state, compare the IFA and ELISA techniques and identify the vectors possibly involved in the cycle of the parasite. Were collected blood samples from 489 dogs that were subjected to detection of anti-Leishmania sp. by IFA and by ELISA. Were considered positive samples ≥40 titers in IFA and for ELISA ≥ 0.174 optical density. Among the samples analyzed, 222 (45.4%) were positive by IFA and 189 (38.7%) by ELISA. Comparing the tests were found 176 positive samples (36.0%) and 254 negative (51.9%) for both techniques. The sensitivity of ELISA was 79.3% and specificity was 95.1%. The global coefficient of the test was 87.0% with kappa coefficient of 0.75. Analysis of variables for dogs with positive serology by IFA showed significant differences regarding the absence of forests and lack of contact with other animal species. Positive sera by ELISA in dogs variables that showed significant differences were the type of riparian vegetation existing in the environment, the lack of garbage, open sewers and released directly into rivers or streams and garbage thrown on wasteland, burned or buried. The result obtained with the capture of sandflies was the predominance of Lutzomyia whitmani with 79.9% of the species collected. The result obtained with the capture of sandflies was the predominance of Lutzomyia whitmani with 79.9% of the species collected. The results showed that the LTA is widespread in the canine population of Bela Vista do Paraiso, and both the IFI and ELISA can be used for diagnosis. So the dog appears as a link between wild and peridomestic cycle of CL may become an amplifier of disease in this ecosystem.

Leishmaniose tegumentar canina no município de Balneário Camboriú, Estado de Santa Catarina / Canine tegumentar leishmaníasis in the town of Balneário Camboriú in the State of Santa Catarina

INTRODUÇÃO: O aumento no número de casos de leishmaniose tegumentar americana no ano de 2005 foi em decorrência do surto ocorrido nos Municípios de Itapema e Balneário Camboriú. O presente trabalho teve como objetivos determinar a possível presença de infecção por Leishmania sp em cães domésticos residentes em foco endêmico para LTA, no Município de Balneário Camboriú e verificar a existência de correlação entre a resposta imune humoral e celular, presença de lesões sugestivas e positividade no exame parasitológico direto. MÉTODOS: Foram cadastrados 275 animais, os quais foram examinados segundo seus aspectos clínicos, desenvolvimento de hipersensibilidade tardia ao antígeno Immunoleish® e respostas sorológicas à reação de imunofluorescência indireta e ao ensaio imunoenzimático. RESULTADOS: Sete animais apresentaram lesões suspeitas, porém não foram encontradas Leishmanias pelo método parasitológico direto. O resultado da sorologia foi de 5,8 por cento de positividade com a RIFI, 6,2 por cento com o ELISA e 1,8 por cento com a prova intradérmica. Somando os cães positivos pelos exames sorológicos e/ou pela prova intradérmica obteve-se um total de 24 positivos, imunoprevalência de 8,7 por cento para LTA. CONCLUSÕES: Há necessidade de mais estudos para avaliar a participação dos cães na cadeia epidemiológica da LTA no Município de Balneário Camboriú.

INTRODUCTION: The increase in American tegumentary leishmaniasis (ATL) cases in 2005 was due to an outbreak that occurred in the towns of Itapema and Balneário Camboriú. This study aimed to determine the possible presence of infection by Leishmania sp in domestic dogs living in an endemic focus of ATL in the town of Balneário Camboriú and verify the existence of a correlation between the humoral and cellular immune responses, the presence of suggestive lesions and positivity in direct parasitological exams. METHODS: A total of 275 dogs were evaluated, examined according to clinic aspects, the development of delayed hypersensitivity to Immunoleish® antigens and serological responses to the indirect immunofluorescence reaction and immunoenzymatic assay. RESULTS: Seven dogs presented suspect lesions, but Leishmania was not detected using the direct parasitological method. The serological result was 5.8 percent positivity using the IIFR technique, 6.2 percent by ELISA and 1.8 percent using the intradermal test. The total number of dogs positive for ATL using the serological exams and/or intradermal test was 24, indicating prevalence of 8.7 percent for ATL. CONCLUSIONS: Further studies are required to evaluate the participation of dogs in the epidemiological chain of ATL in Balneário Camboriú.

Comparison of small mammal prevalence of Leishmania (Leishmania) mexicana in five foci of cutaneous leishmaniasis in the State of Campeche, Mexico / Comparación de las prevalencias de Leishmania (Leishmania) mexicana en mamíferos pequeños en cinco focos de leishmaniosis cutánea en el estado de Campeche, México

In the Yucatan Peninsula of Mexico, 95% of the human cases of Cutaneous Leishmaniasis are caused by Leishmania (Leishmania) mexicana with an incidence rate of 5.08 per 100,000 inhabitants. Transmission is limited to the winter months (November to March). One study on wild rodents has incriminated Ototylomys phyllotis and Peromyscus yucatanicus as primary reservoirs of L. (L.) mexicana in the focus of La Libertad, Campeche. In the present study, the prevalence of both infection and disease caused by L. (L.) mexicana in small terrestrial mammals were documented during five transmission seasons (1994-2004) in five foci of Leishmaniasis in the state of Campeche. Foci separated by only 100 km, with similar relative abundances of small mammals, were found to differ significantly in their prevalence of both symptoms and infection. Transmission rates and reservoir species seemed to change in space as well as in time which limited the implementation of effective control measures of the disease even in a small endemic area such as the south of the Yucatan Peninsula.

En la Península de Yucatán, México, la Leishmaniosis Cutánea es causada por Leishmania (L.) mexicana en 95% de los casos humanos, con una incidencia de 5.08% por cada 100,000 habitantes. El ciclo de transmisión se limita a la estación de invierno (noviembre- marzo). Un estudio de mamíferos silvestres incrimina a Ototylomys phyllotis y Peromyscus yucatanicus como reservorios primarios de L. (L.) mexicana en el foco de infección de La Libertad, Campeche. En el presente estudio, se documenta la prevalencia de infección/enfermedad causada por L. (L.) mexicana en pequeños mamíferos, durante cinco estaciones de transmisión (1994-2004) en cinco focos de CL del estado de Campeche. Los focos separados por solamente 100 km. de distancia, aún cuando tienen abundancias relativas de pequeños roedores similares, fueron significativamente diferentes en relación a la prevalencia de síntomas así como de infección. Las tasas de transmisión y las especies de reservorios parecen estar cambiando tanto en el tiempo como en el espacio, lo cual impide el establecimiento de adecuadas medidas de control de la enfermedad aún en un área endémica tan pequeña como lo es el sur de la Península de Yucatán.

Avaliação sorológica para detecção de anticorpos anti-Leishmania em cães e gatos no bairro de Santa Rita de Cássia, Município de Barra Mansa, Estado do Rio de Janeiro / Serological evaluation for detection of anti-Leishmania antibodies in dogs and cats in the district of Santa Rita de Cássia, municipality of Barra Mansa, State of Rio de Janeiro

A partir de um caso canino de leishmaniose tegumentar americana na localidade de Santa Rita de Cássia, município de Barra Mansa, Rio de Janeiro, foi realizado um inquérito sorológico em 177 cães e 43 gatos. Na avaliação das amostras de soros caninos, 10 por cento foram positivos na reação de imunofluorescência indireta e 10,7 por cento no ensaio imunoenzimático. Entre as amostras de soros felinos testados, nenhum animal foi positivo na reação de imunofluorescência indireta e apenas um (2,4 por cento) felino apresentou reação positiva ao ensaio imunoenzimático. A detecção de Leishmania braziliensis, autóctone em Barra Mansa, faz um alerta para a instalação de um possível foco de leishmaniose tegumentar americana nessa região.

From a canine case of american cutaneous leishmaniasis in the locality of Santa Rita de Cássia, municipality of Barra Mansa, Rio de Janeiro, a serological survey was performed on 177 dogs and 43 cats. Evaluation of the canine serum samples showed that 10 percent had a positive reaction in the indirect immunofluorescence test and 10.7 percent in the enzyme-linked immunosorbent assay. Among the feline serum samples tested, none of the animals had a positive reaction in the indirect immunofluorescence test and only one (2.4 percent) showed a positive reaction in the enzyme-linked immunosorbent assay. The detection of an autochthonous case of Leishmania braziliensis in Barra Mansa gives warning that a focus of american cutaneous leishmaniasis is possibly becoming established in this region.

A serological and molecular investigation of American cutaneous leishmaniasis in dogs, three years after an outbreak in the Northwest of Paraná State, Brazil / Investigação sorológica e molecular da leishmaniose tegumentar americana em cães, três anos após um surto, no Noroeste do Estado do Paraná, Brasil

Classic and molecular (polymerase chain reaction - PCR) techniques were used to diagnose American cutaneous leishmaniasis in 149 dogs from an area in the northwest of Paraná State, Brazil, where an American cutaneous leishmaniasis outbreak occurred in 2002. The results were compared to a set of previously obtained results. Twenty-five dogs had positive indirect immunofluorescence (IIF) (titers > 40), including two animals with suggestive lesions. The percentage of dogs with positive IIF was similar to that found in a previous study. The cultures of the lesion, blood and bone marrow were negative for Leishmania. A direct search for the parasite in the lesions proved negative, although PCR tests were positive. The PCR did not detect the DNA of Leishmania (Viannia) in the blood, even for those that had positive PCR in a previous study. The follow up of the 27 dogs showed that the majority of them had maintained the same levels of antibodies that had been detected previously. There was a reduction in the number of dogs with lesions, probably due to the transmission control measures that were adopted after the outbreak.

Neste estudo, utilizaram-se técnicas clássicas e moleculares (reação em cadeia da polimerase - PCR) para o diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana em 149 cães de uma área no noroeste do Estado do Paraná, Brasil, onde ocorreu um surto de leishmaniose tegumentar americana em 2002; os resultados foram comparados aos obtidos anteriormente. Vinte e cinco cães tiveram a imunofluorescência indireta (IFI) positiva (títulos > 40), incluindo dois animais com lesão sugestiva. O percentual de cães com IFI positiva foi semelhante aos encontrados nos inquéritos anteriores. As culturas dos materiais de lesão, sangue e medula óssea foram negativas para Leishmania. A pesquisa direta do parasito em lesão foi negativa, no entanto a PCR foi positiva. A PCR não detectou DNA de Leishmania (Viannia) no sangue dos cães estudados, mesmo naqueles que tiveram PCR positiva no estudo anterior. O acompanhamento de 27 animais mostrou que a maioria deles permaneceu com os mesmos níveis de anticorpos detectados anteriormente. Houve redução do número de cães com lesões, provavelmente em virtude das medidas de controle da transmissão adotadas após o surto de 2002.

Immunosuppressant effects of leishmania infection in Psammomys obesus trapped in Saudi Arabia

This study was conducted to investigate the immune status of Psammomys obesus [P. obesus] most implicated as a reservoir host of zoonotic cutaneous leishmaniasis [ZCL] in the Al-Ahsa area, Saudi Arabia. Based on the presence of amastigotes in the characteristic lesions and, rodents were divided into two groups. GI was apparently healthy 10 rodents and G2 were infected 10 ones. Reduced leukocyte count, percentage lymphocyte and lysozome activity occurred in infected rodents compared to control ones. The infection significantly reduced the macrophage phagocytic activity reflected by two fold reduction in intravascular carbon clearance compared to control rodents. The results showed that ZCL produced an immunosuppressant effects in P. obesus

Leishmaniose tegumentar americana canina em municípios do norte do Estado do Paraná, Brasil / Canine American cutaneous leishmaniasis in municipalities of northern Paraná State, Brazil

A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é endêmica no norte do Estado do Paraná, Brasil, afetando tanto o homem como os cães. O objetivo deste trabalho foi estudar a ocorrência da doença na população canina em áreas endêmicas de LTA. No período de setembro de 1999 a julho de 2002, foram investigados cães em sete localidades rurais de cinco municípios onde ocorreram casos humanos autóctones da doença, utilizando métodos parasitológicos e sorológicos. Dos 67 cães estudados, 14 (20,9 por cento) tinham lesões sugestivas de LTA, dos quais 3 (21,4 por cento) estavam infectados por Leishmania sp. Trinta e sete (55,2 por cento) cães apresentaram imunofluorescência indireta positiva para Leishmania (Viannia) braziliensis. Os resultados mostram a ocorrência simultânea de leishmaniose humana e canina e indicam a necessidade de estudos adicionais para esclarecer o papel do cão no ciclo de transmissão do parasito nessas áreas.